Tandis que l’on mure la porte de Quirieu, la porte Neuve est aménagée dans la première partie du XVIe
siècle. C’est à l’origine une ancienne tour de guet que l’on transforme, comme en témoignent les ébrasements c'est-à-dire les parties en biais dans l’épaisseur des murs et, les anciens percements visibles sur l’intérieur. Ce sera la dernière porte à être percée.

On lui donne également le nom de porte François Ier pour rappeler les passages que ce souverain fait à Crémieu durant les guerres d'Italie mais aussi, lors d’un pèlerinage qu’il effectue dans l’ancienne chapelle à l’entrée des grottes de La Balme, en compagnie de sa mère, Louise de Savoie.

Cette porte peut être considérée comme le symbole de la transition entre le Moyen-Âge et la Renaissance. En effet, sa couronne de mâchicoulis, c'est-à-dire les balcons ouverts en hauteur sont un élément défensif typique de l'époque médiévale. Cependant, en dessous dans le tiers haut de la porte, au milieu, vous remarquez la présence d'un orifice. Il s'agit d'une canonnière permettant le passage d'une couleuvrine. Ce dispositif préfigure dès lors, l'utilisation de la poudre à grande échelle et de l'artillerie lourde dans les combats, ouvrant ainsi la perspective de batailles bien plus meurtrières.